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  • 第九十六期 單抗、病毒、疫苗純化新神器--東曹TOYOPEARL Sulfate-650F

    2017年07月27日來(lái)源:管理員
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    一、TOYOPEARL Sulfate-650F的簡(jiǎn)介

    1. 帶有硫酸根官能團的陽(yáng)離子交換填料

    ? 官能團為硫酸根(SO4-) ,S-、SP-CM-等類(lèi)型相似,同為陽(yáng)離子交換填料。

    ? 對抗體等蛋白有很高的吸附載量。


    2.
    可有效去除抗體中的多聚體

    ? 相較于其他陽(yáng)離子交換填料,對多聚體有著(zhù)更高的分離效果。

    ? pH低于5.0、并含有0.15 mol/LNaCl緩沖液中仍然可以結合抗體,具有耐鹽性。

    ? 可作為Protein A層析的后續純化步驟。


    3.
    有類(lèi)似于肝素親和填料的分離純化效果

    ? 可以應用于AT-III和其他相關(guān)蛋白的分離純化。

    ? 有望應用于病毒和疫苗的分離純化。


    4.
    適用的緩沖液pH范圍

    ? 一般可以用于pH 4-12的緩沖液中。

    ? 可以用pH 3-13的清洗液進(jìn)行短時(shí)間的CIP處理。

    二、TOYOPEARL Sulfate-650F的基本參數

    性能指標

    規格參數

    蛋白吸附載量

    靜態(tài)

    動(dòng)態(tài)

    114g/L(human IgG)

    95g/L

    離子交換容量

    0.53eq/L

    粒徑

    80%(30-60μm)

    菌落總數

    100 CFU/ml

    內毒素等級

    10.0 EU/ml

    不溶物

    0.2%(干膠)

    異物(colored

    6 顆粒

    出貨溶劑:含0.2mol/L醋酸鈉的20%乙醇溶液


    三、
    TOYOPEARL Sulfate-650F適用樣品


    ? 單克隆抗體

    ? 血漿蛋白、凝血因子

    ? 病毒、VLP、疫苗

    ? 重組蛋白

    ? 堿性蛋白

    四、TOYOPEARL Sulfate-650F的主要特點(diǎn)


    ? 高載量

    ? 多聚體分離

    ? 耐鹽的陽(yáng)離子交換填料

    ? 與肝素親和作用相似(硫酸根官能團)

    五、TOYOPEARL Sulfate-650F的應用條件


    1. 單克隆抗體多聚體的分離純化

    ? IgG可達到100 g/L的高載量。

    ? 可以作為Protein A親和層析的后續純化步驟。


    2.
    pH 5 以下具有耐鹽性

    ? pH 4.7、0.15 mol/L NaCl的緩沖液中可以對樣品進(jìn)行吸附。

    ? Protein A 親和層析或前處理后可以直接進(jìn)行上樣。


    3.
    硫酸根官能團的特異性相互作用

    ? 與肝素親和層析相似,可以與凝血因子、疫苗或病毒結合。

    ? 可以用0-1 mol/LNaCl進(jìn)行鹽梯度洗脫。

    ? 與競爭對手的Sulfate填料具有類(lèi)似的吸附性能,但是Sulfate-650F具有更高的吸附載量(某些填料由于孔徑小,所以蛋白只能結合在填料的表面)。


    4.
    常用的分離條件

    ? 上樣緩沖液的pH要控制在5.5以下。

    ? 優(yōu)化緩沖液的pH和鹽濃度能夠獲得更好的分離效果。

    ? 當緩沖液的pH4.2時(shí),即使在0.3mol/LNaCl的緩沖液中也能夠獲得很高的吸附載量。


    六、多種不同的陽(yáng)離子交換填料對單體和多聚體的分離度比較





    pH 5.5的緩沖液中,mAb單體和多聚體回收率的比較


    七、
    TOYOPEARL Sulfate-650F在類(lèi)似于肝素親和填料方面的應用展望

    1. 類(lèi)似于肝素親和填料的分離純化作用*

    ? 凝血因子:Factor VII、Factor IX、Factor X、凝血酶、AT-III

    ? 組織纖溶酶原激活物(TPA

    ? 脂肪酶、核酸酶有關(guān)(如限制性?xún)惹忻福?、膠原酶、脂蛋白


    2. 利用硫酸根官能團的相互作用*

    ? 病毒、疫苗

    *目前使用TOYOPEARL Sulfate-650F純化的除了核糖核酸酶AAT-III以外,暫時(shí)沒(méi)有其他實(shí)例。


    八、單克隆抗體純化工藝實(shí)例

    實(shí)例1.



    實(shí)例2.



    實(shí)例3.



    九、訂貨信息

    貨號

    描述

    023468

    TOYOPEARL Sulfate-650F, 250ml

    023469

    TOYOPEARL Sulfate-650F,1L

    023470

    TOYOPEARL Sulfate-650F,5L

    023471

    TOYOPEARL Sulfate-650F,50L

    023472

    ToyoScreen Sulfate-650F, 1ml×6

    023473

    ToyoScreen Sulfate-650F, 5ml×6



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