尺寸排阻層析（SEC），又稱(chēng)凝膠過(guò)濾層析或者分子篩，當某液體流經(jīng)多孔的凝膠結構時(shí)，按照溶液中各分子的物理尺寸不同，將液體流動(dòng)相中各分子進(jìn)行分離。直徑大于填料孔徑的分子無(wú)法進(jìn)入孔里面，它們被完全排除，迅速通過(guò)柱子，并首先洗脫。按分子量大小的順序，直徑越小的分子，越能夠進(jìn)入填料的孔隙間，能滲入的體積也越大，洗脫也越晚。因為尺寸排阻層析（SEC）法對分子沒(méi)有吸附能力，其分離機制會(huì )使樣品稀釋洗脫，故通常它不用于層析工藝中的捕獲階段或中間純化步驟。有時(shí)它可用作最后的拋光精制階段，即將目標蛋白從其聚合物或其他分子量顯著(zhù)不用的雜質(zhì)中分離出來(lái)。另一個(gè)應用領(lǐng)域是將純化后的目標蛋白脫鹽。