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  • 第五十四期 Toyopearl HW系列分子篩填料在天然產(chǎn)物純化中的應用

    2015年02月11日source:管理員
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    TOYOPEARL HW 和 TSKgel PW 型尺寸排阻樹(shù)脂是所有東曹公司離子交換、疏水作用和親合層析填料產(chǎn)品的基質(zhì)。在初步聚合反應產(chǎn)生特定的填料粒徑和孔徑后,通過(guò)化學(xué)修飾改變樹(shù)脂表面特征以獲得特定的產(chǎn)品。TOYOPEARL HW產(chǎn)品屬于羥基化的聚甲基丙烯酸類(lèi)樹(shù)脂。通過(guò)化學(xué)手段,獲得不同粒徑(30μm或以上)和孔徑大小的TOYOPEARL HW型尺寸排阻填料。它們與TSKgel PW填料相比,交聯(lián)度更低。低交聯(lián)使得在生產(chǎn)以TOYOPEARL HW為基質(zhì)的離子交換和疏水填料時(shí),能夠提供更多的配體固定化反應或修飾位點(diǎn)。因此,與相應的TSKgel PW 基質(zhì)相比,修飾后的TOYOPEARL HW 樹(shù)脂填料具有更高的動(dòng)態(tài)吸附載量。HW 和 PW 樹(shù)脂填料由于具有同樣的基質(zhì)骨架,相同類(lèi)型官能團的填料對于蛋白質(zhì)或雜質(zhì)的保留具有相似的選擇性。 TOYOPEARL HW 樹(shù)脂填料,可以在高線(xiàn)性流速下使用,且能承受高達3bar的工作壓力。

    Toyopearl

    分子量排阻范圍

    Sephadex

    右旋糖酐

    蛋白

    HW-40

    100-7000

    100-10000

    LH-20,G-25

    HW-50

    500-20000

    500-80000

    G-75,G-100,G-150

    HW-55

    1000-200000

    1000-700000

    G-100,G-200

    HW-65

    10000-1000000

    50000-1000000

    6B,4B

    HW-75

    100000-10000000

    500000-50000000

    4B,2B

    填料粒徑?? S級:20-40μm

    ?????????? F級:30-50μm

    ?????????? C級:50-100μm

    ?????????? EC級:100-300μm(只針對HW-40提供EC級粒徑的填料)

    與糖相比,由于蛋白結構緊湊,因此同類(lèi)分子篩填料對糖和蛋白的排阻界限有所差別。Toyopearl填料的骨架為含羥基的親水性聚甲基丙烯酸樹(shù)脂,由于不含糖基,與多糖類(lèi)填料相比,不會(huì )和糖類(lèi)樣品發(fā)生非特異性相互作用。

    使用HW填料對各種糖類(lèi)進(jìn)行分析的應用匯總表

    ?

    化合物

    Toyopearl填料

    備注

    酸性環(huán)糊精/Acidic cyclodextrin

    SP-650C,HW-40F

    專(zhuān)利

    酸性寡糖/Acidic oligosaccharide

    DEAE-650M

    1-100 mM KCl梯度

    抗肝炎多糖/Anti-hepatitis ? polysaccharide

    DEAE-650C

    專(zhuān)利

    支鏈低聚果糖/Branched ? fructooligosaccharide

    HW-40S

    專(zhuān)利

    致癌物抑制劑/Carcinogen promoting ? inhibitor

    HW-65F

    專(zhuān)利

    性腺A/Gonaderan A

    DEAE-650

    專(zhuān)利

    紫草多糖/Lithosperman A

    DEAE-650

    專(zhuān)利

    麥芽戊糖苷/Maltopentoside

    HW-40S

    流動(dòng)相:水

    多糖/Polysaccharide

    HW-65F

    0.1 ? ?M NaCl

    淀粉/Starch

    HW-75F


    TX-1多糖/TX-1 ? polysaccharide

    HW-65F

    專(zhuān)利

    ?

    低分子生物活性物質(zhì)的分離


    化合物

    Toyopearl填料

    備注

    Acakyphidins

    HW-40


    花青素/Anthocyanin

    HW-40F


    蒽醌/Anthraquinone

    DEAE-650C

    專(zhuān)利

    Black vinegor

    HW-50F

    流動(dòng)相:水

    兒茶酚/Catechin

    HW-40


    栗癭鞣質(zhì)/Chestanin

    HW-40F

    流動(dòng)相:50%的甲醇

    地高辛/Digoxin

    HW-40F

    流動(dòng)相:50%的甲醇

    Epigarocatechin

    HW-40


    黃烷/Flavan

    HW-40C


    類(lèi)黃酮配糖類(lèi)/Flavonoid glycoside

    HW-40


    沒(méi)食子酰熊果酚苷/Galloylarbutin

    HW-40F


    異黃酮/Isoflavonoid

    HW-40

    流動(dòng)相:甲醇/水=70/30

    哇巴因/Ouabain

    HW-40F

    流動(dòng)相:50%的甲醇

    植物生長(cháng)激素/Plant growth hormone

    HW-40


    多酚/Polyphenol

    HW-40C, ? HW-40EC


    花色素低聚物/Proanthocyndin oligomer

    HW-40F

    專(zhuān)利

    原花青素/Procyanidine

    HW-40S,HW-40F


    丹寧酸/Tannin

    HW-40


    茶黃素/Theaflavin

    HW-40

    專(zhuān)利

    ?

    結論:

    ?

    Toyopearl HW-40 系列填料具有很多的優(yōu)勢:

    ?

    1. 優(yōu)異的剛性強度和化學(xué)穩定性

    ?? * 可以放大至更大的制備規模和獲得更高的流速(適用于超過(guò)200L的層析制備柱)

    ?? * 適用于強堿溶液

    2. 4種不同的粒徑可供選擇

    ?? * S級(30μm)、F級(45μm)、C級(100μm)和EC級(200μm)

    ?? * 高分辨率、高流速。

    3. 適用于水和各種有機溶劑

    ?? * 甲醇、乙腈、丙酮、四氫呋喃等等

    ?? * 根據樣品的溶解性來(lái)選擇合適的有機溶劑(流動(dòng)相)

    ?

    Toyopearl 填料使用上的注意點(diǎn):

    ?

    1.???? 裝填前的勻漿準備

    Toyopearl系列產(chǎn)品出貨時(shí)保存在20%的乙醇中(乙醇/水=20/80)。需要注意的是,如果需要在氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯等非極性溶劑中使用時(shí),需要進(jìn)行逐步置換,而不能進(jìn)行互不相溶的溶液間的直接替換。

    2???? 填料的裝填

    Toyopearl填料的剛性強度好,相比瓊脂糖、葡聚糖基質(zhì)的軟膠來(lái)講,更適宜在高流速下進(jìn)行裝填以便獲得更高柱效、更高分辨率的層析柱。



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