一、總體介紹
? ? Contichrom CUBE & HPLC連續流層析系統,采用最優(yōu)化的2柱位設計,可運行多種層析模式,如標準批處理過(guò)程、Capture SMB、MCSGP(多柱逆流溶劑梯度純化)、N-Rich等,實(shí)現了層析新技術(shù)與層析系統軟硬件設計的完美結合。?
二、系統主界面
系統主界面采用圖形化設計,顯示泵速、流路等信息,直觀(guān)形象,易于操作。
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三、Contichrom CUBE & HPLC功能匯總
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四、詳細功能介紹
1)單柱層析模式
系統配備Batch向導軟件,可運行易于設計和操作的單柱層析模式。
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2)兩步層析整合為一步層析
所有的Contichrom系統可以將兩個(gè)層析步驟(例如捕獲和精純)整合為一個(gè)單一的過(guò)程,第一步層析洗脫的產(chǎn)物可以直接被稀釋?zhuān)瑥亩苯舆M(jìn)行第二步層析,因此省略了中間的間歇過(guò)程,這是非常適用于高通量純化的。
3)Capture SMB
傳統層析工藝,由于流穿效應,有40-60%的填料是無(wú)法被完全利用的,從而使得載量和處理量大為受限。Capture SMB用于優(yōu)化捕獲環(huán)節,作為最簡(jiǎn)單和最強大的2柱位設計,可使純化效率顯著(zhù)提高,并且使填料用量大為縮減。
Capture SMB是將第一根層析柱的樣品流穿繼續上樣至第二根層析柱,待第一根層析柱完全滿(mǎn)載后,方結束其上樣進(jìn)行淋洗,并繼續進(jìn)行洗脫、再生、再平衡操作,而此時(shí)第二根層析柱會(huì )獨立進(jìn)行上樣操作。通過(guò)切換柱位操作,保證2根層析柱的洗脫、再生、上樣等操作交替銜接進(jìn)行,保證連續上樣,從而實(shí)現工藝與系統硬件設計的完美結合,使填料利用率最大化,累積用量大為縮減。
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舉例說(shuō)明:Mabselect SuRe:靜態(tài)載量60 g/L,使用壽命200 cycles;處理量:600 kg mAb,填料體積:均為100 L。
4)MCSGP
傳統層析精純工藝,往往需要在收率和純度之間做出權衡,兩者此消彼長(cháng)。如何在保證高回收率的同時(shí),獲得高純度的產(chǎn)品,一直是層析精純工藝所面臨的難點(diǎn)。
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MCSGP(Multicolumn Countercurrent Solvent Gradient Purification),可將重疊部分回收,進(jìn)行循環(huán)式的層析操作,從而最大限度地提純產(chǎn)品,使得純度和收率二者兼得。
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應用案例:羅氏ADC藥物Kadcyla,采用MCSGP工藝,收率由34% 提升至61%,提升比例為80%。
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5)N-Rich
N-Rich工藝是微量物質(zhì)的富集過(guò)程,比如將產(chǎn)品的相關(guān)雜質(zhì)選擇性地富集在一個(gè)循環(huán)的層析過(guò)程中,待富集至目標量,再進(jìn)行洗脫回收。該方法特別適用于分離與產(chǎn)品有關(guān)的雜質(zhì),如異構體和聚集體,并同時(shí)用于發(fā)現研究。
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應用案例:合成肽雜質(zhì)的富集,富集倍數高達600倍。
案例內容