胰島素藥物發(fā)展歷程
年代 | 胰島素種類(lèi) | 主要分離純化方法 | 胰島素純度 |
90年代末-至今 | 胰島素類(lèi)似物 | 表達系統的改進(jìn) 離子交換和制備型高效液相 | ＞99% |
80至90年代 | 重組人胰島素 | 離子交換和制備型高效液相色譜 | 99% |
50至70年代 | 動(dòng)物胰島素 | 常規層析法 離子交換和分子篩層析 | 約95% |
20至40年代 | 動(dòng)物胰島素 | 結晶和重結晶 | 約80% |
司美格魯肽純化工藝舉例
多肽的分離純化工藝舉例（2-3步）
離子交換色譜分離材料
1. Toyopearl NH2-750F為一款耐鹽型的陰離子交換填料，主要官能團為伯胺基，同時(shí)也具有很弱的疏水模式作用，從而使其具有耐鹽性。
2. 一般而言，細胞液中都含有0.1-0.15mol的NaCl，使用普通的離子交換填料，必須經(jīng)過(guò)脫鹽的處理，但是針對NH2-750F這款填料，可以直接進(jìn)行上樣無(wú)需脫鹽，大幅度節省操作的時(shí)間和成本。
3. 同時(shí)，這款填料孔徑較大，所以分離大分子的效果也非常明顯。
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反相色譜分離材料
1.高效液相反相色譜技術(shù)分辨率高。
2.精細純化單元：2-3步高效反相色譜精純步驟，降低離子交換不能去除的雜質(zhì)含量（如二聚體雜質(zhì)、A鏈8-9位殘基之間肽鍵斷裂雜質(zhì)、酰胺殘基的脫氨雜質(zhì)等）。
3.硅膠反相填料精純關(guān)鍵點(diǎn)：分離選擇性、載樣量和回收率、填料化學(xué)穩定性（耐受強堿在線(xiàn)清洗，CIP)。
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測試條件條件：0.1M NaOH/EtOH=50/50
H&E（DICP）填料的堿性耐受性明顯優(yōu)于市場(chǎng)上穩定性最好的Kromasil填料，具有優(yōu)異的化學(xué)穩定性。
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應用案例-多肽產(chǎn)品
多肽純化設備的選型
1.?分子篩填料設備選型
使用分子篩填料要求是填料裝填高度大于75cm，層析柱柱效要求高，上樣量比較低，只有填料體積的1%；目前多肽中應用相對較少。
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2.?離子交換填料設備選型
用于離子交換填料，疏水填料等，用于填料篩選和工藝開(kāi)發(fā)及中試項目。
用于離子交換填料，疏水填料等，用于手動(dòng)層析柱，簡(jiǎn)易層析系統或全自動(dòng)層析系統。
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3.?反相填料和聚合物填料設備選型
反相C18/C8，聚合物填料走制備液相和中高壓DAC設備，可以保證產(chǎn)品高柱效和產(chǎn)品分離度。
C18中高壓層析系統和動(dòng)態(tài)軸向壓縮柱產(chǎn)品，用于客戶(hù)的工業(yè)放大。
廈門(mén)客戶(hù)?2020年1L防爆系統+DAC100；裝填填料是Cytiva SOURCE?30Q或東曹 Super Q-650M及DEAE 5PW(20μm) 及國內同類(lèi)型產(chǎn)品。
