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  • 第三十二期 常見(jiàn)天然類(lèi)黃酮色素的分離純化及應用實(shí)例

    2015年02月11日來(lái)源:管理員
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    常見(jiàn)天然類(lèi)黃酮色素的分離純化及應用實(shí)例?


    類(lèi)黃酮色素的應用開(kāi)發(fā)現狀


    許多的天然類(lèi)黃酮色素都是對人體有益的天然活性成分,具有抗氧化、預防心血管疾病、防癌、抗炎等多種生理功效,特別在醫藥方面,有良好的應用和開(kāi)發(fā)前景。


    色素類(lèi)黃酮化合物廣泛分布于植物界,幾乎絕大多數植物都能合成黃酮類(lèi)。近年來(lái),人們對類(lèi)黃酮化合物的抗氧化功能和機理進(jìn)行了比較深入的研究,證實(shí)該類(lèi)化合物是一種很強的活性氧自由基清除劑。迄今已發(fā)現了 2000 多種黃酮類(lèi)化合物,它們多數以甙的形式存在,少數以游離形式存在。黃酮類(lèi)化合物泛指具有 C6-C3-C6 基本骨架的化合物,包括黃酮、黃酮醇、異共同酮、查爾酮及它們的二氫衍生物和黃烷醇等。主要有本犀草素、蘆丁、橘皮色素、紅花黃色素、原花青素等。


    類(lèi)黃酮色素的分離純化方法


    天然黃酮類(lèi)色素多有酚羥基取代,因此是極性較強的化合物。按照相似相溶原理,可溶于極性化合物,所以對天然黃酮類(lèi)色素的提取一般用甲醇、乙醇、丙酮水溶液等極性溶劑。


    對于花色素類(lèi)用酸性極性溶劑提取,以保持它的穩定性。?


    柱層析是分離純化天然黃酮類(lèi)化合物的一種主要工具。以前的研究中通常用聚酞胺、硅膠、氧化鋁等做填充料,由于這些材料吸附量大,前處理煩瑣,回收率低等缺點(diǎn),現極少應用。對于酚類(lèi)化合物的分離純化現階段普遍使用的填充料是交聯(lián)葡聚糖凝膠。


    LH‐20(SePhadexLH‐20)分離黃酮類(lèi)色素特性如下:?


    交聯(lián)葡聚糖凝膠是一種高度交聯(lián)的葡聚糖,在它上面可以根據分子篩效應將物質(zhì),以分子大小遞減的次序洗脫得以分離。其中羥基丙醇葡聚糖凝膠(即 SePhadexLH‐20)是通過(guò)葡聚糖與甘油聚合,在分離花色素、黃酮類(lèi)化合物得到了成功的應用。?


    Sephadex LH‐20 是羥基丙醇葡聚糖凝膠,適用于純化一些植物次生代謝產(chǎn)物,不但具有分子篩效應,還可以在極性與非極性溶劑組成的系統中起反相層析的作用,所以,它結合了凝膠、分配色譜、吸附層析于一身,能分離結構相近的分子。Sephadex LH‐20 有較強的吸附能力和分辨能力,以水一乙醇為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,反復分離,可以對花色素、多聚體花色素進(jìn)行比較單一的分離。?


    ? ? ? ? 用 Sephadex ?LH‐20 分離黃酮類(lèi)化合物的機理是:分離黃酮苷元時(shí),主要是吸附起作用,分離次序取決于游離酚羥基的數目;分離黃酮苷時(shí),分子篩起作用,相對分子質(zhì)量的大小或含糖的多少決定化合物被分離的次序。黃酮昔元游離酚羥基越多,越難以洗脫,相對分子量越大,苷元上連接的糖越多,越容易洗脫。?


    在前處理上,SePhadexLH‐20 可以用有機溶劑溶脹而不影響它的溶脹度,在分離樣品時(shí)改變洗脫的極性。當分離結束后,再用大量水一丙酮(l:l)沖洗,可以吸附再生后重復使用,分離效果保持十幾年不變。 ??


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