? ? ? ChromaCon公司位于瑞士蘇黎世,是一家致力于連續流層析技術(shù)開(kāi)發(fā)的企業(yè),其自主研發(fā)的Contichrom CUBE連續流層析系統,采用最優(yōu)化的2柱位設計,可運行多種層析模式,如標準批處理過(guò)程、Capture SMB、MCSGP、N-Rich等,實(shí)現了層析新技術(shù)與層析系統軟硬件設計的完美結合,使得設備成本更低,構造更為簡(jiǎn)化,產(chǎn)品產(chǎn)率更高,并可使層析填料、緩沖液等成本投入大為節省。
? ? ? 屆時(shí),慧德易還將攜Contichrom Discovery層析系統、QuikSep EC手動(dòng)層析柱、QuikSep SC簡(jiǎn)易層析系統等多套設備共同亮相,可為廣大客戶(hù)提供操作演示。
? ?傳統層析工藝,由于流穿效應,有40-60%的填料是無(wú)法被利用的,從而使得載量和處理量大為受限。Capture SMB用于優(yōu)化捕獲環(huán)節,作為最簡(jiǎn)單和最優(yōu)化的2柱位設計,可使純化效率顯著(zhù)提高,并且使填料用量大為縮減。
? ? ? Capture SMB是將第一根層析柱的抗體/蛋白流穿繼續上樣至第二根層析柱,待第一根層析柱完全滿(mǎn)載后,方結束其上樣進(jìn)行淋洗,并繼續進(jìn)行洗脫、再生、再平衡操作,而此時(shí)第二根層析柱會(huì )獨立進(jìn)行上樣操作。通過(guò)切換柱位操作,保證2根層析柱的洗脫、再生、上樣等操作交替銜接進(jìn)行,從而實(shí)現工藝與系統硬件設計的完美結合,使填料利用率最大化,累積用量大為縮減。
舉例說(shuō)明
Mabselect SuRe:靜態(tài)載量60 g/L,使用壽命200 cycles;
處理量:600 kg mAb,填料體積:均為100 L。
MCSGP(多柱逆流溶劑梯度純化)
? ? ??MCSGP(Multicolumn Countercurrent Solvent GradientPurification)用于精純環(huán)節,可有效克服SMB(模擬移動(dòng)床)僅適用于二元分離、無(wú)法實(shí)現線(xiàn)性梯度的缺點(diǎn)。
? ? ? ?傳統的層析精純工藝,必須在收率和純度之間做出權衡,兩者此消彼長(cháng)。如何在保證獲得高純度產(chǎn)品的同時(shí),得到高收率,一直是層析精純工藝所面臨的難點(diǎn)。
? ??? MCSGP工藝,可將含有不純組分的產(chǎn)品回收在一個(gè)封閉的環(huán)內,進(jìn)行循環(huán)式的層析操作,從而最大限度地提取純產(chǎn)品,使得收率和純度二者兼得。
應用案例
? ??? ?N-Rich工藝是微量物質(zhì)的富集過(guò)程,比如將產(chǎn)品的相關(guān)雜質(zhì)選擇性地富集在一個(gè)循環(huán)的層析過(guò)程中,待富集至目標量,再進(jìn)行洗脫回收。該方法特別適用于分離與產(chǎn)品有關(guān)的雜質(zhì),如異構體和聚集體,并同時(shí)用于發(fā)現研究。
應用案例
Discovery技術(shù)簡(jiǎn)介
? ? ? Discovery層析技術(shù)可將多步層析整合為一步,從而縮短純化時(shí)間,提高純化效率。第1步層析的產(chǎn)物無(wú)需進(jìn)行收集,通過(guò)在線(xiàn)稀釋?zhuān)芍苯由蠘又恋?根層析柱。即第1步層析的洗脫與第2步層析的上樣同時(shí)進(jìn)行,使純化周期顯著(zhù)縮短。ContichromDiscovery系統可額外擴展出35個(gè)入口,實(shí)現高通量純化。
應用案例
? ? ? 第一步Protein A;第二步CIEX;第三步Desalting(分子篩脫鹽換液)。
? ? ? ?在該過(guò)程中,Protein A的洗脫組分經(jīng)過(guò)在線(xiàn)稀釋?zhuān)苯由蠘又罜IEX層析柱,CIEX進(jìn)行線(xiàn)性洗脫,去除降解物及聚集體,將目標組分直接上樣至脫鹽柱。三步層析緊密銜接,前一步層析的洗脫與后一步層析的上樣同時(shí)進(jìn)行,使得純化效率顯著(zhù)提高。
? ? ? ?最終產(chǎn)品經(jīng)SE-HPLC檢測,純度高達99.5%,二聚體含量?jì)H為0.5%,比Protein A - Desalting兩步層析所得產(chǎn)品的二聚體含量降低近6倍,該產(chǎn)品可直接用于氨基酸序列測定、二硫鍵測定以及糖型分析等高純度要求的檢測。
? ? ? ?Discovery高通量(HT)型系統,采用Protein A - CIEX- Desalting三步向導模塊,每次上樣10 mL單抗上清液(1.0 mg/mL),每次產(chǎn)量均≥6.5 mg。單個(gè)樣品的三步純化耗時(shí)約為74 min,在24 h內純化出多達19個(gè)樣品,而且該時(shí)間包含了層析柱的清洗環(huán)節。該系統持續運行5天,純化樣品總數量高達91個(gè)。
培訓日程安排:
2018.09.19:CaptureSMB原理及功能演示。
2018.09.20:MCSGP、N-Rich原理及功能演示。
報名及培訓說(shuō)明:
1. 培訓費用:8000元/人。
2. 培訓地點(diǎn):深圳市南山區高新中一道10號深圳高新區生物孵化器2-412
3. 報名聯(lián)系:張永闊 ?手機:13910866728 ? E-mail:zyk@prep-hplc.com? ?QQ:2355545357
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